蔡司光學(xué)、激光共聚焦、電子和 X 射線顯微鏡|我們?nèi)绾芜x擇一臺(tái)適合自己的顯微鏡——光學(xué)部件的選擇
顯微鏡的種類,包括正置/倒置、寬場(chǎng)顯微鏡、超高分辨率顯微鏡、激光共焦顯微鏡等等,不知道大家有沒(méi)有認(rèn)真聽(tīng)講。今天給大家?guī)?lái)的是顯微鏡光學(xué)部件的介紹。
顯微鏡不同種類的光源
在評(píng)價(jià)顯微鏡光源優(yōu)缺點(diǎn)前先介紹光源照明的兩個(gè)重要指標(biāo)參數(shù):
1、顯色性
● 光源的顯色性,就是燈泡讓物體呈現(xiàn)『真實(shí)顏色』的能力,通常用Ra表示。光源的顯色性越好,光譜連續(xù)性就越接近太陽(yáng)光,顏色還原越好。
2、色溫
● 黑體從絕對(duì)零度(-273℃)開(kāi)始加溫后所呈現(xiàn)的不同顏色。計(jì)量單位為“K”(開(kāi)爾文)。因?yàn)楸尘邦伾绊懹^察樣本的色彩還原度,所以不同的色溫適用的觀察對(duì)象不同。
早期的顯微鏡依靠油燈或自然光等外部光源,雖然顯色性好,但可控性差?,F(xiàn)代顯微鏡通常使用可以被控制的整體光源,主要有鹵素?zé)?、汞燈、氙燈、LED燈等,那么我們?cè)谫?gòu)買顯微鏡時(shí)該如何選擇光源,他們的區(qū)別是什么?
1、鹵素?zé)艄庠?
● 鹵素?zé)艄庾V和日光接近,顯色性好,色溫顏色偏暖黃。在觀察某些物質(zhì)時(shí)需借助色溫轉(zhuǎn)換片。鹵素?zé)襞莸膲勖^短,一般使用1000小時(shí)亮度就會(huì)降低到原先的一半左右。
2、高壓汞燈
● 高壓汞燈光源(UHP,UMPRD,UHE,SHP等)工作時(shí),電流激發(fā)高壓汞蒸汽發(fā)光。色溫偏冷白,在觀察某些物質(zhì)時(shí)需借助色溫轉(zhuǎn)換片,光強(qiáng)度高,適于熒光、若熒光觀察,使用時(shí)需要預(yù)冷預(yù)熱,壽命短在200小時(shí)左右,更換成本高。
3、高壓氙燈
● 光譜和日光接近,并且亮度高。壽命比較長(zhǎng),是比較好的光源之一。但危險(xiǎn)系數(shù)高,易爆炸,使用時(shí)要注意其強(qiáng)紫外的傷害性。
4、新型LED光源
● LED光源體積小,亮度高,光強(qiáng)連續(xù)可調(diào)。使用壽命長(zhǎng),有效時(shí)間可達(dá)到50000小時(shí)以上;不需要預(yù)熱,即開(kāi)即用,響應(yīng)時(shí)間快;節(jié)能環(huán)保不存在對(duì)人體和環(huán)境污染的風(fēng)險(xiǎn);顯色性好,適合明場(chǎng)及熒光成像,是優(yōu)選光源。ECHO正倒置一體顯微鏡采用的新型LED光源。
聚光鏡又名聚光器,通常裝在顯微鏡載物臺(tái)的下方。聚光鏡功能是用來(lái)彌補(bǔ)光亮的不足并適當(dāng)改變光的性質(zhì),將光線聚焦于被檢物上,得到最佳的照明效果。按級(jí)別可分為:長(zhǎng)工作距離聚光鏡、高分辨率聚光鏡和多功能聚光鏡。
1、長(zhǎng)工作距離聚光鏡
● 工作距離長(zhǎng),NA值較低,適用于低倍物鏡。并適合觀察培養(yǎng)皿等較厚的物體。
2、高分辨率聚光鏡
● 工作距離短,NA值較高,適用于高倍物鏡。適合觀察切片等較薄的物體。
3、多功能聚光鏡
● 可以進(jìn)行相差、暗場(chǎng)、偏光、微分干涉等觀察方式。根據(jù)觀察需要進(jìn)行選擇。
聚光鏡的調(diào)節(jié):
聚光鏡孔徑光闌(即:光圈)開(kāi)的大小與物鏡上標(biāo)識(shí)的數(shù)值孔徑有對(duì)應(yīng)關(guān)系。應(yīng)開(kāi)到物鏡數(shù)值孔徑的75%-85%。每一支物鏡都有類似這個(gè)的標(biāo)識(shí),例如:10X/0.25、40X/0.65,這其中的0.25 以及0.65即為物鏡的數(shù)值孔徑,聚光鏡的光闌調(diào)節(jié)要遵照這些去調(diào)節(jié)。
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